UV1901PC紫外分光光度計的用法及使用過程
紫外分光光度計是根據(jù)樣品的濃度和吸光度是成正比關系的,濃度越大,吸收值越高,也就是瑯伯-比爾定律的原理研發(fā)的測試物質(zhì)含量以及定性的實驗室常用儀器。它的應用領域涉及制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、化學化工、計量科學、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領域中的科研、教學等各個方面,用來進行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應動力學研究等。
所以紫外分光光度計用的zui多的還是定量分析,定量分析的種類有很多,這里介紹常用的幾種定量分析方法:
1、法:法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用zui多的一種方法。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎的分析方法,某一物質(zhì)在一定波長下ε值是一個常數(shù),石英比色皿的光程是已知的,也是一個常數(shù)。因此,可用紫外可見分光光度計在λmax波長處,測定樣品溶液的吸光度值A。然后,根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/εb,則可求出該樣品溶液的含量或濃度。
2、標準法:在選定的波長處,在相同的測試條件下,分別測試標準樣品溶液C標和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標和A樣。然后,按下式求得樣品溶液的濃度或含量。
C樣=A樣/A標×C標
3、標準曲線法
紫外可見分光光度計zui常用的定量分析方法是標準曲線法。即先用標準物質(zhì)配制一定濃度的溶液,再將該溶液配制成一系列的標準溶液。在一定波長下,測試每個標準溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標,標準溶液對應得濃度為橫坐標,繪制標準曲線。zui后,將樣品溶液按標準曲線繪制程序測得吸光度值,在標準曲線上查出樣品溶液對應的濃度或含量。
4、 其它分析方法
除上述幾個分析方法外經(jīng)常使用的分析方法外,還有比吸收系數(shù)法、zui小二乘法、解聯(lián)立方程法和示差分光光度法。
(2) 定性分析
如果未知物的紫外吸收光譜的zui大吸收峰波長λmax、zui小吸收峰波長λmin、zui大摩爾吸光系數(shù)εmax,以及吸收峰的數(shù)目、位置、拐點與標準光譜數(shù)據(jù)*一致,就可以認為是同一種化合物。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質(zhì)。
定量分析和定性分析是分光光度計的兩大主要功能,特別是定量分析。其它的分析都應該是從這兩大種功能中發(fā)展出來的。
儀器的使用情況說明:
先將UV1901PC紫外分光光度計開機自檢后
UV1901PC紫外分光光度計進入自檢狀態(tài),分別檢測微機系統(tǒng)、濾光片驅(qū)動馬達定位、鎢燈電壓和氘燈電流、燈源初始位,自檢氘燈能量及鎢燈能量,并自動校準波長(以氘燈譜線656.1nm為基準)。
按[↑][↓]鍵選擇所需功能項,選中項將反顯,按[ENTER]鍵進入子菜單功能塊。
按UV1901PC紫外分光光度計[GOTO WL]鍵修改波長,光標自動閃爍在波長輸入處,用數(shù)字鍵輸入您所需測定的波長值,確認后按[ENTER]鍵加以確定。(本例波長為500nm)
屏幕提示:請稍后···
UV1901PC紫外分光光度計在自動將波長調(diào)整到您所需測定的波長值。如輸入數(shù)值有錯,請按[CE]鍵清除后重新輸入。如波長選擇不在可選擇范圍內(nèi)(190 nm~1100nm)。
屏幕提示:輸入錯誤
此時輸入正確波長即可。
屏幕中zui下方的四個功能,分別由儀器鍵盤上的四個功能鍵來實現(xiàn)。
F1:為您提供測試數(shù)據(jù)類型選擇:T(透射比)
F2:為您提供測試數(shù)據(jù)類型選擇:Abs(吸光度)
F3:為您提供測試數(shù)據(jù)類型選擇:Conc(濃度)
F4:對所測得數(shù)據(jù)進行打印輸出
當您把所需參數(shù)輸入結(jié)束后,用一對配套石英比色皿倒入?yún)⒈葮悠罚ū纠齾⒈葮悠窞榭諝猓?。分別放入?yún)⒈裙饴泛蜆悠饭饴?。然后按?/span>[ZERO]鍵。
屏幕提示:Blanking 100%
儀器在自動調(diào)整0%(暗電流)及100%(滿度)。自調(diào)結(jié)束屏幕提示消失后,取出樣品光路中的比色皿,重新倒入待測樣品并放回樣品光路樣品池,蓋好樣品盒蓋,此時就可得到您所需數(shù)據(jù)。
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