紫外分光光度計(jì)通常用作物質(zhì)鑒定、純度檢查,有機(jī)分子結(jié)構(gòu)的研究。在定量方面,可測(cè)定結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物和混合物中各組分的含量,也可以測(cè)定物質(zhì)的離解常數(shù),絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù),物質(zhì)分子量鑒別和微量滴定中指示終點(diǎn)以及在高效液相色譜中作檢測(cè)器等。
一、紫外分光光度計(jì)的技術(shù)原理:
物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
二、紫外分光光度計(jì)的組成:
各種型號(hào)的紫外-可見分光光度計(jì),就其基本結(jié)構(gòu)來(lái)說(shuō),都是由五個(gè)基本部分組成,即光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器及信號(hào)指示系統(tǒng)。
1、光源
在紫外可見分光光度計(jì)中,常用的光源有兩類:熱輻射光源和氣體放電光源。熱輻射光源用于可見光區(qū),如鎢燈和鹵鎢燈;氣體放電光源用于紫外光區(qū),如氫燈和氘燈。
2、單色器
單色器的主要組成:入射狹縫、出射狹縫、色散元件和準(zhǔn)直鏡等部分。單色器質(zhì)量的優(yōu)劣,主要決定于色散元件的質(zhì)量。色散元件常用棱鏡和光柵。
3、吸收池
吸收池又稱比色皿或比色杯,按材料可分為玻璃吸收池和石英吸收池,前者不能用于紫外區(qū)。吸收池的種類很多,其光徑可在0.1~10cm之間,其中以1cm光徑吸收池較為常用。
4、檢測(cè)器
檢測(cè)器的作用是檢測(cè)光信號(hào),并將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)。現(xiàn)今使用的分光光度計(jì)大多采用光電管或光電倍增管作為檢測(cè)器。