紫外分光光度計由于準確度高、測定限度低、設備簡便、儀器成本低、易于操作等優點,已成為制藥生產中*的檢測設備之。
紫外分光光度法是通過測定物質在某些特定波長處或一定范圍內的吸光度或發光強度,定性和定量對物質進行分析的方法,其理論基礎為朗伯-比耳定律,溶液的吸光度與吸光物質含量、液層厚度乘積成正比。對于一般的紫外分光光度法,其測量的相對誤差在1%~3%。隨著大量新的顯色劑的合成及應用,尤其是有關多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,推進了元素測定的靈敏度的大幅提高。采用預富集和示差法,適用質量分數從常量(1%~ 50%)到痕量(10-1°~10-8)。
在各國藥典中,藥品的理化常數、鑒別、檢査和含量測定等各個項目中,都能見到紫外分光光度法的應用實例。目前利用
紫外分光光度計分析的藥物品種有維生素、抗生素、解熱藥、去痛藥、降血壓藥、安定藥、鎮咳藥、滴眼藥、磺胺類藥、利尿藥、某些婦科藥、痢疾藥、腹瀉藥、抗腫瘤藥、抗結核藥等。
在藥典和藥品標準中應用紫外分光光度法的項目有吸收系數、鑒別、顏色檢査、純度檢査、溶出度、含量均勻度檢査和含量測定等。在制藥生產中,紫外分光光度法應用*多的是藥物含量的測定、藥物雜質檢測、藥物穩定性考察、釋放度、藥物負載行為測定及物質結構鑒定等方面。
藥物含量測定:
藥品的含量是評定藥品的主要指標,在設計其測定方法時,含量測定方法的選擇要著眼于準確性、穩定性和可重復性。紫外分光光度計操作簡單、具有較高的準確性和可重復性,現可以直接用于藥品含量的檢測。目前紫外分光光度計檢測較多的藥物劑型包括片劑、膏劑、注射劑等。
1片(滴丸)劑中含量測定:
紫外分光光度法測固體制劑中藥品含量,需制備已知含量的標準品溶液和樣品溶液,測定*吸光度處波長;然后以含量為橫坐標,吸光度為縱坐標,進行線性回歸,并建立標準曲線;取已配制好樣品溶液適量,置于石英比色皿中,在*吸光度波長處測定溶液吸光度,通過標準曲線計算樣品中的含量。
蓋柯等用紫外分光光度法在297nm處,測定了小劑量阿司匹林腸溶片的含量。2013年,郭錦明等人在原有的阿司匹林溶出乙酰水楊酸含量測定的基礎上加以改進,將測試波長從可見光區遷移到紫外光區,改進后的方法操作簡便、快速、準確,專屬性強,并將此方法運用在藥劑實驗教學。
如果有些片劑藥物沒有強的生色基團,沒有紫外吸收或是吸收很弱,不能用紫外分光法檢測器直接檢測的情況下,可以通過將其與生色基團衍生,生成有紫外吸收的衍生物來檢測其的含量。1993年,Drazen等人利用阿侖膦酸鈉易與金屬鰲合的性質,建立了阿侖膦酸鈉與Cu2+鰲合形成具有紫外吸收的衍生物,從而可用普通的紫外分光光度計檢測阿侖膦酸鈉的含量。在此基礎上,2000年,Kuljan in 等人通過將阿侖膦酸鈉與Fe3+絡合,用紫外分光光度法測定了阿侖膦酸鈉的含量,可檢測質量濃度2 |xg/mL 的量。
利用同樣的原理,通過鋁敏化紫外分光光度法,在pH=6.30的緩沖溶液中測定片劑中依諾沙星含量,可檢測的濃度在0.4~37.5 |xmol ? L-1,檢出限為 0.125 |xmol ? L-1,此方法測定依諾沙星片劑的含量靈敏、簡便、快速、準確[。另外,2008年,Walash等人利 用Cu2+和利塞膦酸鈉鰲合,形成具有紫外吸收的衍生物,簡單、快速、地測定出了利塞膦酸鈉的含量,該方法的檢測范圍是2~40 |xg/mL,檢測*限度是 0.03 |xg/mL。